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The Splitting of Sperm Heads from Tails in Eight Mammalian Species and the Measurement of their Sizes

 

作者: Janet BROTHERTON,  

 

期刊: Andrologia  (WILEY Available online 1977)
卷期: Volume 9, issue 1  

页码: 1-14

 

ISSN:0303-4569

 

年代: 1977

 

DOI:10.1111/j.1439-0272.1977.tb01250.x

 

出版商: Blackwell Publishing Ltd

 

关键词: spermatozoa;Coulter Counter;counting;size

 

数据来源: WILEY

 

摘要:

SummaryEjaculated spermatozoa from man, the European wild boar and the bull, and spermatozoa from the cauda epididymes of the rabbit, rat, mouse, hamster and Guinea pig were treated with a sonic bath, a sonic probe, trypsin with and without prior treatment with a sulphhydryl reagent, pronase and alkalis. The fragments produced were counted and sized in an accurately calibrated Coulter Counter, Model ZBIndustrial, before and after Zaponin treatment to lyse accompanying debris and the peripheral cytoplasm. Head and tail fractions were separated on sucrose gradients. Each species required different conditions for cleavage or fragmentation. Rabbit and bull spermatozoa were cleaved by the ultrasonic bath exactly into heads and tails, producing twice the number of particles with two peaks in the size distribution curves but with some 60% loss of total sperm volume which became the soluble fraction. The ultrasonic probe, and for the bull, pronase, produced the same cleavage but these more drastic treatments dissolved a considerable portion of the tail fraction. Rodent spermatozoa, especially the rat, were cleaved perfectly into heads and tails by mild trypsin treatment. All the non‐rodent spermatozoa were resistent to trypsin cleavage, although prior treatment with a sulphhydryl reagent caused swelling and subsequent trypsin action caused digestion into miscellaneous pieces. Spermatozoa from the boar and from man could not be cleaved by any of the procedures. The sonic probe produced fragmentation with progressive dissolution of the tail fragments and a single peak in the size distribution curve corresponding to small stripped heads. The soluble fraction always constituted a large proportion of the original whole spermatozoa.ZusammenfassungEjakulierte Spermatozoen vom Menschen, dem europäischen wilden Eber, Bullen und Spermatozoen aus der Cauda epididymis des Kaninchens, der Ratte und Maus sowie des Hamster und Meerschweinchens wurden im Ultraschallbad mit einer Ultraschallsonde mit Trypsin, mit und ohne vorherige Behandlung mit Sulphhydyl‐Reagenz, mit Pronase und Alkali versetzt. Die entstandenen Bruchstücke wurden gezählt und in einem genau geeichten Coulter‐Counter, Modell ZBIndustrial, vor und nach Zaponin gemessen, um beigefügten Debris und Cytoplasma abzulösen. Kopf‐ und Schwanzanteile wurden über einen Zuckergradienten getrennt. Jede Probe verlangte eine besondere Behandlung, um die möglichst genaue Trennung von Kopf‐ und Schwanzanteilen zu erreichen. Kaninchen‐ und Bullen‐Spermatozoen wurden im Ultraschallbad genau in Kopf und Schwanz getrennt, wobei die doppelte Teilchenmenge mit 2 Anreicherungsgipfeln in der Formverteilungskurve jedoch mit ca. 60%igem Verlust an Spermatozoen entstand. Die ultrabeschallte Probe (und für den Bullen, Pronase) erreichten die gleiche Trennung von Kopf‐ und Schwanzanteilen, jedoch lösten die vorher beschriebene drastische Behandlung einen beträchtlichen Teil der Schwanzfraktion auf. Nagetierspermatozoen, besonders die der Ratte, wurden genau zwischen Kopf‐ und Schwanzanteil durch vorgeschaltete Trypsinbehandlung aufgetrennt. Die Spermatozoen von anderen Tieren waren resistent gegenüber der Trypsinbehandlung, wenn auch vorheriges Einwirken mit dem Sulphhydylreagenz eine Schwellung erzeugte und anschließendes Versetzen mit Trypsin die Spermatozoen in verschieden große Bruchstücke auftrennte. Spermatozoen vom Eber und vom Menschen konnten mit diesem Verfahren nicht aufgetrennt werden. Die ultrabeschallte Probe erzeugte unterschiedliche Bruchstücke mit zunehmender Auflösung der Schwanzanteile und nur einen Gipfel in der Größenverteilungskurve, der kleinen enthäuteten Spermatozoenköpfen entsprach. Die löslichen Bruchstücke bestanden immer zu einem großen Teil au

 

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