ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960703

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

数据来源: WILEY

摘要:

AbstractDie Beziehung zwischen Struktur und Aktivität von Enzymen kann heute erstmals durch systematische Veränderung der Proteinstruktur analysiert werden. Die rapide Entwicklung der DNA‐Rekombinations‐Techniken einerseits und die Erarbeitung leistungsfähiger Methoden zur chemischen Synthese von DNA‐Fragmenten andererseits ermöglichen es, auf einfache Weise Proteine durch spezifische Mutation der entsprechenden Gene gezielt zu verändern. Die kinetische Analyse von Mutanten‐Enzymen und die durch hochauflösende Röntgen‐Kristallographie erhaltenen Befunde lassen direkt Rückschlüsse auf die Beziehung zwischen Struktur und Funktion zu. Insbesondere können jetzt Enzym‐Substrat‐Wechselwirkungen und deren Bedeutung für Katalyse und Spezifität detailliert untersucht werden. Den gezielten Austausch einer oder mehrerer Aminosäuren eines Proteins – eine „ortsspezifische Mutagenese”︁ („site‐directed mutagenesis”︁) führten wir exemplarisch zur Analyse der Struktur‐Funktions‐Beziehung an der Tyrosyl‐tRNA‐Synthetase ausBacillus stearothermophilusdurch; dabei konzentrierten wir uns auf das Studium der Rolle der Wasserstoffbrückenbindungen für Substratspezifität und Katalyse. Die Bindung von Tyrosin und ATP kann nur unter Berücksichtigung der Austauschreaktion mit den Wassermolekülen der Hydrathülle verstanden werden. Diese Tatsache und die Kenntnis der detaillierten Struktur ermöglichten es uns, ein Enzym mit erhöhter Substrataffinität maßzuschneidern. Durch ein solches „Protein‐Engineering”︁ können Enzyme mit neuen Spezifitäten, Aktivitäten und Struktureigenschaften gewonnen und direkte Einblicke in die Art und Weise der Enzymkatalyse erhalten werden. Wir fanden beispielsweise, daß die Katalyse der Bildung von Tyr‐AMP aus Tyr und ATP hauptsächlich auf elektrostatischen Kräften und Wasserstoffbrückenbindungen beruht, die im Übergangszustand stärker als im Grundzustand sind – ein „strain

ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960704

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

数据来源: WILEY

摘要:

AbstractNeben den Antibiotica sind die Mycotoxine die zweite große Gruppe von Wirkstoffen aus Mikroorganismen. Man kennt schon über 300 Mycotoxine, die sich 25 Strukturtypen zuordnen lassen. Sie werden von etwa 350 Schimmelpilzen mit annähernd 10 000 Stämmen produziert. Durch die Neigung der Mycotoxin‐bildenden Schimmelpilze, sich aggressiv auf Nahrungsmitteln auszubreiten, können sie epidemieartig auftretende Mycotoxikosen verursachen. – Nach Isolierung, Strukturbestimmung und Feststellung der biologischen Wirkungen gelang es, die Biosynthese der Mycotoxine weitgehend aufzuklären. Danach lassen sich die Mycotoxine auf nur drei Gruppen von biogenetischen Schlüsselbausteinen zurückführen: Polyketide, Isopentenylpyrophosphat und Aminosäuren. Mycotoxine sind zumeist unpolar, chemisch recht beständig, werden in hohen Konzentrationen gebildet und enthalten – im Gegensatz zu den Antibiotica – keine Zucker. Mycotoxine rufen eine enorme Vielfalt toxisch‐pharmakologischer Wirkungen hervor, z. B. Leberdegeneration, Hämorrhagie, Carcinomentstehung. Kumulationsneigung im Säugetierorganismus und lange Inkubationszeiten erschweren die Erkennung der Mycotoxikosen und machen schon geringste Konzentrationen in der Nahrung zum Risiko. So darf das besonders gefährliche Aflatoxin B1den schwierig zu kontrollierenden Grenzwert von 5 ppb (5 μg/kg) in der Nah

ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960705

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

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摘要:

AbstractOrganolanthanoid‐Verbindungen waren bis vor zehn Jahren noch Kuriositäten. Abgesehen von der Beschreibung weniger Cyclopentadienyl‐ und Indenyl‐Derivate fand man in der Literatur nur Arbeiten, die einer gewissenhaften Nachprüfung nicht standhielten. Sorgfältige Untersuchungen mit modernster Präparations‐ und Analysentechnik unter Einbeziehung der Einkristall‐Röntgenstrukturanalyse ermöglichten es, hochinteressante Verbindungen mit unsubstituierten und substituierten Cyclopentadienyl‐Liganden sowie homoleptische Organolanthanoid‐Komplexe, aber auch Allyl‐, Alkinyl‐ und selbst Hydrid‐ und Phosphorylid‐Komplexe zu isolieren und zu charakterisieren. Sogar Trimethylsilyl‐ und Carbonylmetall‐Einheiten ließen sich mit Lanthanoiden verknüpfen. Die ausnahmslos gegenüber Luft und Feuchtigkeit extrem empfindlichen Verbindungen eröffnen neue Möglichkeiten auf dem Gebiet der Katalyse und bieten, wie neueste Untersuchungen an Pentamethylcyclopentadienyl‐Derivaten, an Organolanthanoid(II)‐Verbindungen und an Hexamethyllanthanoid‐Komplexen zeigen, ein eno

ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960706

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

数据来源: WILEY

ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960707

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

数据来源: WILEY

ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960708

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

数据来源: WILEY

ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960709

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

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ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960711

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

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ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960712

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

数据来源: WILEY

ISSN:0044-8249    

DOI:10.1002/ange.19840960713

出版商:WILEY‐VCH Verlag GmbH    

年代:1984

数据来源: WILEY