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Vermehrungskinetik und Verwendbarkeit eines stark zytopathogenen VD‐MD‐Virusstammes für diagnostische Untersuchungen mit der Mikrotiter‐Methode

 

作者: H.‐R. Frey,   B. Liess,  

 

期刊: Zentralblatt für Veterinärmedizin Reihe B  (WILEY Available online 1971)
卷期: Volume 18, issue 1  

页码: 61-71

 

ISSN:0931-2021

 

年代: 1971

 

DOI:10.1111/j.1439-0450.1971.tb00343.x

 

出版商: Blackwell Publishing Ltd

 

数据来源: WILEY

 

摘要:

ZusammenfassungAus einem an VD‐MD‐ähnlichen Erscheinungen erkrankten Jungrind wurde ein isoliertes Agens durch den Virusplaque‐Reduktionstest und den Serumneutralisationstest mit der Mikrotiter‐Methode als VD‐MD‐Virus identifiziert. Seine serologische Verwandtschaft zu dem Virusstamm Oregon C 24 V wurde festgestellt. Der isolierte Virusstamm zeigte von allen bisher untersuchten Stämmen die kürzeste Vermehrungszeit. Die höchsten Konzentrationen an freigesetztem und zellgebundenem Virus waren nach 48 Stunden p. i. erreicht. Ebenso frühzeitig kam es zur Ausbildung eines vollständigen zytopathogenen Effektes. Die Technik der Titration des isolierten Virus und der Titration von VD‐MD‐virusneutralisierenden Antikörpern mit Hilfe der Mikrotiter‐Methode wurde beschrieben. Die Methode erwies sich sowohl mit sekundären Kälberhoden‐ als auch mit fötalen Kälbernierenzellen im sog. Simultanverfahren (gleichzeitige Einsaat der zu testenden Reagentien mit der Zellsuspension) für die Diagnostik als geeignet.SummaryGrowth curve studies and applicability of a highly cytopathogenic BVD‐MD‐virus‐strain for diagnostic purposes using the micro‐titre methodAn agent isolated from a heifer with signs of bovine virus diarrhoea mucosal disease was identified as BVD‐MD virus (strain A 1138/69) by the plaque‐reduction test and 50 % end‐point method. A serological relationship with the Oregon C 24 V variant strain of BVD‐MD virus was established. The strain A 1138/69 exhibited the shortest time of viral multiplication compared with other strains of BVD‐MD virus. Highest concentrations of extra‐cellular as well as cell‐bound infectious virus were reached 48 hours after culture inoculation and this correlated with the time necessary for a complete cytopathogenic destruction of monolayer cell cultures.The techniques of titration of the virus and titration of BVD‐MD virus neutralising antibodies by the micro‐titre method are described. This method has proved suitable for diagnostic purposes not only with secondary testicular calf cells but also with foetal calf kidney cells, using the so‐called simultaneous procedure (simultaneous inoculation of the test reagent and the cell suspension).RésuméMultiplication et epplicabilité d'une souche virale VD‐MD fortement cytopathogène pour le diagnostic par la méthode de microtitrationA l'aide du test de réduction de plaques et du test de neutralisation sérique par la méthode de microtitration, on identifie un virus VD‐MD à partir d'un agent isolé chez un jeune boeuf présentant des symptômes ressemblant à la VD‐MD. On peut établir sa parenté sérologique avec la souche virale Orégon C 24 V. La souche virale isolée manifeste un temps de propagation plus court que les souches examinées jusqu'alors. 48 heures p. i., on atteint les plus fortes concentrations en virus libre et virus cellulaire. Un effet cytopathogène complet se développe aussi rapidement. On décrit la technique de la microtitration du virus isolé et de la microtitration des anticorps neutralisant le virus VD‐MD. Cette méthode se révèle appropriée pour le diagnostic, non seulement avec des cellules testiculaires secondaires de veaux, mais aussi avec des cellules foetales de reins de veaux, dans le procédé dit “simultané” (inoculation simultanée des réactifs à tester et de la suspension cellulaire).ResumenMultiplicación y posibilidad de empleo de una estirpe de virus VD‐MD citopatógena extrema para estudios diagnósticos con la técnica de microtulaciónEn una becerra enferma, con síntomas parecidos a los de la diarrea vírica‐enfermedad mucosa, se identificó un agente aislado, mediante la prueba de reducción del plaqué de virus y de la de seroneutralización con la técnica de microtítulo, como virus VD‐MD. Se estableció su parentesco serológico con la estirpe de virus Oregon C 24 V. La estirpe de virus aislada mostraba entre todas las estirpes examinadas hasta la fecha el tiempo de multiplicación más breve. Las concentraciones más elevadas en virus liberado y ligado a la célula se alcanzaron al cabo de 48 horas p. i. También precoz fué la formación de un efecto citopatógeno total. Descríbense las técnicas de titulación del virus aislado y de la titulación de anticuerpos neutralizantes de virus VD‐MD con ayuda del método de microtítulo. El método resultó apropiado para el diagnøstico tanto con células secundarias de testículos de ternero como

 

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