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Ein Western‐Blot‐Test zur serologischen Diagnose der Infektiösen Anämie der Pferde*

 

作者: W. Rossmanith,   E. Horvath,  

 

期刊: Journal of Veterinary Medicine, Series B  (WILEY Available online 1989)
卷期: Volume 36, issue 1‐10  

页码: 49-56

 

ISSN:0931-1793

 

年代: 1989

 

DOI:10.1111/j.1439-0450.1989.tb00569.x

 

出版商: Blackwell Publishing Ltd

 

关键词: Equine Infectious Anemia;Western‐Blot;serodiagnosis

 

数据来源: WILEY

 

摘要:

SummaryA Western‐Blot Test for the serodiagnosis of Equine Infectious AnemiaAfter electrophoretic separation in SDS‐PAGE structural proteins of the virus of Equine Infectious Anemia (EIA) were easily blotted by the semi‐dry‐blotting method onto nitrocellulose filters. Strips of these filters were used for antibody demonstration, and positive reactions thereof were intensified by a biotin‐avidin‐peroxidase system. Sensitivity of this system was so high as to allow readable interpretation of bands up to the dilution of 1: 6,400 of a strongly positive serum. Frequently this procedure allowed to make a firm diagnostic Western‐Blot diagnosis on far weaker equine sera. Interpretation of results proved, however, difficult with sera, which formed one single band only. This observation, although of weak grade, had to be made in some 5 % of sera stemming from horses with a certainly negative history of EIA. Consequently, we conclude, that a policy followed in the serodiagnostic Western‐Blot of human AIDS should also be adopted for the interpretation of the EIA Western‐Blot, namely to declare as positive merely horse sera which evidence more than one single band, whereof at least one band should represent a viral glycoprotein.ZusammenfassungMit dem einfach durchzuführenden Semi‐dry‐blotting (Filterblotting) wurden Strukturproteine des Virus der Infektiösen Anämie (EIA) der Pferde nach elektrophoretischer Auftrennung in SDS‐PAGE auf Nitrocellulosefilter transferiert. Davon wurden Streifen zum Antikörpernachweis verwendet und positive Reaktionen durch ein Biotin‐Avidin‐Peroxidasesystem verstärkt. Die Empfindlichkeit des Nachweissystems erlaubt ablesbare Reaktionen bis zu Serumverdünnungen von 1: 6400, gemessen an einem stark positiven Serum. Das Verfahren gestattet teilweise auch an weit schwächeren Seren einwandfrei positive Western‐Blot‐Diagnosen. Problematisch stellte sich die Beurteilung, falls eine einzige Bande zu beobachten war, die, wenn auch schwachen Grades, bei etwa 5 % bestimmt EIA‐negativen Seren auftrat. Wie bei der Diagnostik des humanen AIDS (HIV‐Infektion) sollten nur Seren mit mehr als einer Bande, wovon zumindest eine ein virales Glycoprotein darstellt, i

 

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